Farklı gelişim evrelerindeki yağ hücrelerinde niban geninin antiapoptotik ve lipogenik etkilerinin araştırılması
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Marmara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyoloji Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2016
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: MEHTAP ÇEVİK
Danışman: BELGİN SÜSLEYİCİ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Gerçek zamanlı hücre monitorizasyon sistemi kullanılarak olgun adipositlerin birtakım stres koşullarını tetiklediği bilinen lineloik asit (LA), stearik asit (SA), etanol ve hidrojen peroksitin farklı dozlarına cevap olarak proliferasyonları incelenmiştir. Bu proliferasyon eğrilerinden faydalanılarak IC50 değerleri tespit edilmiştir. 50, 100, 250, 300, 400, 600, 800 ve 1000 μM hidrojen peroksitin (H2O2) olgun adipositler üzerine olan etkisi 130 saat boyunca gözlemlendi. 1 mM ve 800 μM hidrojen peroksitin 3T3-L1 adipositleri üzerine letal etkili olduğu saptandı. 600, 400 ve 200 μM linoleik asit uygulamasının adiposit proliferasyonuna olan etkisi yaklaşık 120 saat boyunca incelendi ve kontrol grubuna göre 600 μM linoleik asitin adipositler üzerine letal etkili; diğer dozların ise antiproliferatif etkili olduğu saptandı. 250, 150, 100 ve 50 mM etanolün olgun adipositlerin proliferasyonu üzerine olan etkileri yaklaşık 190 saat boyunca incelendi. Uygulanan tüm dozların kontrole göre antiproliferatif etkili olduğu tespit edildi. Bu çalışmalar sonrası proliferasyon verilerine dayanarak her bir ajan için belirli saatlerdeki IC50 değerleri tespit edildi. Bu değerler belirli süreler boyunca hücrelere uygulandıktan sonra hücrelerden Total RNA izolasyonu yapılarak Niban genine ait gerçek zamanlı qPZR (Kantitatif Polimeraz Zincir Raeksiyonu) çalışması yapıldı. 4 saat 300, 5 saat 600 ve 800, 24 saat 600 ve 800 μM hidrojen peroksit uygulaması; 4 saat 50 mM stearik asit ve 24 saat 90 mM etanol uygulamalar sonucu Niban gen anlatımı kontrole göre azaltmış bulunmuştur. 24 saat 480 μM linoleik asit uygulaması ise Niban gen anlatımını kontrole göre arttırmıştır. Ayrıca adipositlerdeki apoptozun inhibisyonun obezite ile ilişkili hastalıkların tedavisinde kullanımının yeni bir terapötik strateji olabileceği hipotezinden yola çıkarak Niban geninin adipogenik ve lipogenik süreçteki rolünün ortaya konulması amacıyla henüz yeni farklılaşmış ancak yağ birikimi çok az olan pre-adipositler ile uzun süre kültüre edilmiş ve aşırı yağ birikimi gözlemlenen olgun adipositlerde Niban gen anlatımı karşılaştırmalı olarak çalışılmıştır. Sonuç olarak olgun adipositlerdeki Niban gen anlatımı kontrole göre çok yüksek; pre-adipositlerdeki ise kontrole göre düşük bulunmuştur.