POLİVİNİL ALKOL, JELATİN VE HİDROKSİMETİL SELÜLOZ İÇEREN ÇAPRAZ BAĞLI HİDROJELE LİPAZ ENZİMİNİN İMMOBİLİZASYONU


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Marmara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2019

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: EMRE ÖZAYDIN

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Serap Demir

Eş Danışman: Emrah Çakmakçı

Özet:

Lipazlar (triasilgliserol ester hidrolazlar, EC 3.1.1.3), triaçilgliserollerin hidrolizini kataliz

eden suda çözünen bir enzimdir. Candida rugosa’dan elde edilen lipazlar diger kaynaklardan

elde edilenlere göre yüksek aktiviteleri ve genis bir spesifiklik göstermeleri nedeniyle daha

fazla dikkat çekmektedir. Bu çalısmada polivinil alkol, jelatin ve hidroksimetil selüloz içeren

CMC-PVA-GEL film sentezlendi. CMC-PVA-GEL film FT-IR ile karakterize edildi.

Candida rugosa’dan elde edilen lipaz CMC-PVA-GEL film üzerine kovalent olarak

immobilize edildi. 1 g polimere 91,37 mg enzim baglandıgı bulundu. mmobilize ve serbest

enzimler p-nitrofenil palmitatın hidrolizi ve para nitrofenil linoleatın sentezi seklinde iki farklı

reaksiyon sisteminde analiz edildi. Hidrolitik aktivite ve sentetik aktivite yöntemleri

kullanılarak serbest ve immobilize enzim üzerine depolama süresi, kinetik özellikleri, sıcaklık

ve tekrar kullanılabilirlik gibi özellikleri incelenerek sonuçlar karsılastırıldı. Hidrolitik

aktivite üzerine pH etkisi incelendiginde serbest enzim pH 7’de, immobilize enzim pH 8’de

maksimum aktivite gösterdigi bulundu. mmobilizasyon sonucunda enzimin sıcaklıga olan

dayanıklılıgı gelisti ve 50°C’de maksimum aktivite gösterdi. Michaelis Menten sabiti serbest

ve immobilize enzim için sırayla 0,56 ve 1,66 mM olarak hesaplandı. Serbest ve immobilize

enzim için Vmaks degerleri sırayla 2,08 ve 0.192 mM/dakika olarak hesaplandı. 11 deneme

sonrasında immobilize enzimin aktivitesi %71 olarak tayin edildi. Serbest enzim 20 gün

içinde tamamen aktivitesini kaybetmistir. mmobilize enzim 30 günde aktivitesinin sadece

%28’ini kaybetmistir. Sentetik aktivite üzerine sıcaklık etkisi incelendiginde serbest enzim

37°C’de, immobilize enzim 60°C’de maksimum aktivite gösterdigi bulundu. Serbest ve

immobilize enzim için Km ve Vmaks degerleri sırasıyla 5 mM, 1x10-3 mM/dakika bulunurken

immobilize enzim için 0,66 mM, 1x10-4 mM/dakika olarak bulunmustur. 20 deneme

sonrasında immobilize enzim ilk aktivitesininin %30’unu kaybetmistir. mmobilize enim 30

gün sonunda aktivitesinin %64’ünü korumustur. Ticari öneme sahip olan lipazların

immobilizasyonu için yeni, maliyeti az olan polimerik desteklerin gelistirilmesi gündemde

olan bir konudur. Biz de çalısmamızda hızlı, kolay ve daha az zahmetli bir yöntemle

immobilizasyonu gerçeklestirdik.