Akademik Veri Yönetim Sistemi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Marmara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2015
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ONUR SARSAR
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Ayşe Ogan
Eş Danışman: Serap Demir
Özet:
Genel olarak laktaz olarak bilinen β-Galaktosidaz (EC 3.2.1.23) özellikle glukoz ve galaktozun aynı oranda karışımının üretilmesinde kullanılır. Laktaz besin endüstrisinde özellikle süt ürünlerinde tatlılık, çözünürlük, lezzet ve sindirilebilirliğin arttırılmasında yoğun olarak kullanılır. Laktaz ayrıca biyoteknoloj, tıbbi kimya ve analitik kimyada da kullanılmaktadır. Laktoz hidrolizinde immobilize laktazın kullanılması ekonomik olarak uygulanabilir olmasına rağmen enzim maliyeti ve immobilizasyon prosesi açısından düşündürücüdür. Bu çalışmada glisidil metakrilat içeren epoksi fonksiyonaliteli UV ile sertleşen polimer UV ışığı kullanılarak hazırlandı. Escherichia coli'den elde edilmiş laktaz enzimi bu hazırlanan polimere kovalent bağlanma ile immobilize edildi. Polimerik desteğin morfolojisi taramalı elektron mikroskobu (SEM) ve Fourier Dönüşümlü Infrared (FT-IR) spektroskopisi yardımıyla karakterize edildi. İmmobilizasyon işlemi ile enzimin sıcaklık direnci artırıldı ve 60ºC'de maksimum aktivite gözlendi. Serbest ve immobilize enzimlerin pH'a bağlı aktiviteleri incelendi ve serbest enzim pH 7.0'de maksimum aktivite gösterirken immobilize enzim için bu değer 6.5 olarak bulundu. 12 deneme sonrasında immobilize enzim ilk aktivitesininin %51'ini korumuştur. Serbest enzim aktivitesini 5 haftada kaybederken immobilize enzim yalnızca %18.7'sini kaybetmiştir. Serbest enzim için Michaelis-Menten sabiti Km ve Vmaks değerleri sırasıyla 0,647 mM, 0.7263 mM/dakika bulunurken immobilize enzim için 1.109 mM, 0.08318 mM/dakika olarak bulunmuştur. Enzim epoksi fonksiyonlu glisidil metakrilat polimerine immobilize edildiğinde serbest enzime göre uzun saklama kararlılığı, tekrar kullanım ve termal dirençlilik gibi üstünlükler kazanmıştır.