Aşırı halofil Archaea'nın çeşitli polimerik destek maddelerine immobilizasyonu ve selülaz aktivitelerinin tayini


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Marmara Üniversitesi, Fen - Edebiyat Fakültesi, Biyoloji Bölümü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2004

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: ASLI GÖZÜAÇIK

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Ayşe Ogan

Eş Danışman: Meral Birbir

Özet:

ÖZET AŞIRI HALOFİL ARCHAEA'NIN ÇEŞİTLİ POLIMERIK DESTEK MADDELERİNE İMMOBİLİZASYONU ve SELÜLAZ AKTİVİTELERİNİN TAYİNİ Tuzköy Tuz Madeni'nden seçilen ve %25, %15 ve %10'luk NaCl içeren besiyerinde üreyen kalitatif olarak selülaz aktivitesi gösterdiği saptanan 4TK1, 2TK2 ve 2TK3 suşlannın selülaz aktiviteleri kantitatif olarak saptanmıştır. Bu aktiviteye tuz konsantrasyonun, pH'ın ve sıcaklığın etkisi araştınldıktan sonra hücreler poliakrilamid ve alginata immobilize edilmiş, immobilizasyon öncesi ve sonrası ile zamanın enzim aktivitesi üzerine etkisi araştırılmıştır. Selülazın tuz bağımlılığı, selülaz enzim çalışmalarında kullanılan NaCl'ün konsantrasyonunu değiştirerek saptanmıştır. NaCl konsantrasyonu 0.5-4 M arasında değiştirilirken diğer şartlar sabit tutuldu ve selülazın 2.5 M NaCl konsantrasyonunda en fazla aktif olduğu bulundu. %10 NaCl içeren besiyerlerinde yetiştirilen bütün suşlann en yüksek aktiviteyi gösterdiği ve suşlar içerisinde en fazla TK2'nin aktivite gösterdiği gözlendi. Selülazın sıcaklık profilini tayin etmek için iki saat boyunca 2.5 M NaCl içeren enzim çalışma çözeltisinde 20-60°C arasında aktiviteyi ölçtüğümüzde en yüksek aktivite 25°C olarak saptandı ve %10 NaCl içeren besiyerinde yetiştirilen 2TK2 susunun en fazla aktivite gösterdiği saptandı. Selülaz aktivitesi pH 7'de en yüksek aktivite gösterdi ve bu pH kültür ortamının pH'ına karşılık gelmektedir ve yine %10 NaCl içeren besiyerinde yetiştirilen 2TK2 susunun en iyi aktiviteyi gösterdiği saptandı. Optimal çalışma şartlan saptandıktan sonra hücreler poliakrilamid ve sodyum alginata immobilize edildi. %25 NaCl içeren besiyerinde yetişen 4TK1 susu ve %15 NaCl içeren besiyerinde yetişen 2TK2 ve 2TK3 suşlan en yüksek selülaz aktivitesi vigösterdi. Hücreler için alginat, poliakrilamid ile karşılaştırıldığında iyi bir destek maddesi değildi ve her iki destek maddesi için de aktivite immobilizasyon işleminden sonra belirgin bir şekilde düştü. Haziran, 2004 Ash GÖZÜAÇIK vıı