Research Information System
15. Antimikrobik Kemoterapi Günleri, İstanbul, Turkey, 9 - 11 May 2024, pp.72-73, (Summary Text)
Giriş ve Amaç: Bu çalışmada, klinik örneklerden izole edilen H. influenzae izolatlarının in vitro
antibiyotik duyarlılıklarının belirlenmesi ve beta-laktamlara dirençlilerde, direnç
mekanizmalarının fenotipik ve genotipik olarak ortaya konması amaçlandı. H. influenzae’da
beta-laktam direnci, beta-laktamaz üretimi ve penisilin bağlayan protein 3’te (PBP3) görülen
bazı mutasyonlarla ilişkilendirilmiştir.
Gereç ve Yöntem: Hastane Mikrobiyoloji Laboratuvarı’nda 2022 yılında klinik örneklerden
izole edilen 122 H. influenzae çalışmaya dahil edildi. H. influenzae izolasyonu için çikolata agar
(PVX, BioMérieux, Fransa) kullanıldı. Bakteri tanımlaması, Matriks Aracılı Lazer Dezorpsiyon
İyonizasyon Uçuş Zamanlı Kütle Spektrometresi (MALDI-TOF MS, BioMérieux, Fransa) ile
yapıldı. İzolatların antibiyotik duyarlılıkları, EUCAST v 14.0’a göre disk difüzyon yöntemiyle
çalışıldı. Beta-laktam direnci taraması, benzilpenisilin tarama (BPT) testi ile yapıldı ve zon çapı
12 mm’den küçük izolatlarda β-lak varlığı, BBL Cefinase Paper Discs (Becton Dickinson, ABD)
testiyle fenotipik olarak; PZR ile genotipik (blaTEM, blaROB) olarak araştırıldı. Ayrıca BPT
pozitif izolatlarda (β -lak pozitif amoksisilin klavulanik asite duyarlılar hariç), PBP3 kodlayan ftsI
geninin 705 bp.’lik bölümü PZR ile amplifiye edildi ve PZR ürünleri Sanger yöntemiyle dizileme
için Eurofins Genomics Lab.’na (Almanya) gönderildi. Dizileme sonuçları, beta-laktam
direnciyle ilişkili mutasyonların varlığı açısından National Center for Biotechnology
Information (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) veri tabanında bulunan ampisilin duyarlı
referans ‘H. influenzae Rd KW20 (AAC22787.1)’ dizisi ile karşılaştırılarak mutasyonların varlığı
araştırıldı.
Bulgular ve Sonuç: BPT testi, 122 izolatın 57’sinde (%46,7) pozitif bulundu (Tablo 1). Bu
izolatların 14’ü hem ‘cefinase’ hem PZR (blaTEM) ile; 1’i ise sadece PZR (blaROB) ile β-lak
pozitifti. Totalde β -lak pozitif izolat sayısı 15 (%12.3) olarak bulundu. β -lak pozitif izolatların
hepsi ampisiline dirençli (BLPAR); 9’u ayrıca amoksisilin klavulanik asite de dirençliydi
(BLPACR). ftsI gen dizileme sonuçları: BPT pozitif 57 izolattan 51’i (β-lak pozitif amoksisilin
klavulanik asit duyarlı 6 izolat hariç) dizi analizine gönderildi (Tablo 2). Altısında hiçbir direnç
mutasyonu saptanmadı. 39 izolat, düşük düzey beta-laktam direnciyle ilişkilendirilen N526K
mutasyonuyla grup II’de; 4 izolat ise yüksek düzey beta-laktam direnciyle ilişkilendirilen S385T
mutasyonuyla grup III benzeri ve grup III+’da yer aldı. Sonuç: •İzolatlarımızın yarısına yakını
(%46.7) beta-laktamlardan en az birine dirençli•İzolatlarımızda beta-laktamaz pozitifliği
%12.3,•ftsI direnç mutasyonu taşıyan izolat oranımız oldukça yüksek (%35.2),•İzolatlarımızın
büyük bölümü ftsI grup II’de, ve•Hiçbir izolatımızda seftriakson ve karbapenem direnci yok.