Akademik Veri Yönetim Sistemi
XL. Uluslararası Türk Mikrobiyoloji Kongresi, Antalya, Türkiye, 16 - 20 Kasım 2022, ss.263-264
Giriş ve Amaç: Kolistin çoklu ilaca dirençli gram negatif enfeksiyonlarda önemli antibiyotiklerden biridir. EUCAST kolistin duyarlılığı
için altın standart olarak sıvı mikrodilüsyon testini(SMD) önermektedir. Bazı gram negatif bakteriler için 2020 yılında CLSI disk
elüsyon testlerini de kolistin duyarlılığını saptamak için kabul edilebilir yöntem olarak göstermiştir.Bu çalışma da amacımız ticari
bir kit olan Micronaut MİK Strip (MERLIN Diagnostika GmbH, ,Almanya) testinin ve kolistin sıvı disk elüsyon testinin etkinliğini altın
standart olan sıvı mikrodilüsyonla karşılaştırmaktır.
Gereç ve Yöntem: Marmara Üninersitesi Pendik Eğitim ve Araştırma Hastanesi Klinik Mikrobiyoloji laboratuvarına 1 Ocak 2021-
30 Temmuz 2022 tarihleri arasında çeşitli klinik örneklerden etken olarak saptanan çoklu ilaca dirençli A.baumanii, P.aeruginosa,
K.pneumoniae, S.maltophilia izolatları çalışmaya dahil edilmiştir. İzolatların kolistin MİK’leri şu şekilde belirlenmiştir:1-Micronaut
MİK Strip yöntemi: Kolistin emdirilmiş hazır 96 kuyucuklu mikroplaklarda çalışılmıştır. MİK aralıkları 0,0625 μg /ml ile 64 μg/ml
aralığındadır. Bakteri suspansiyonları 0.5 McFarland bulanıklığına getirilip hazır katyon eklenmiş Mueller Hinton sıvı besiyerine
eklendikten sonra kuyucuklara dağıtılıp 35°C’de 16-20 saat inkübasyondan sonra değerlendirilmiştir.2-Sıvı Disk elüsyon yöntemi: Bu
yöntemde katyon eklenmiş Mueller Hinton sıvı besiyeri içeren biri üreme kontrolü olmak üzere dört tüp kullanılmıştır.Tüplere sırasıyla
bir, iki ve dört adet kolistin diski (10 μg) eklenmiştir. 0.5 McFarland standardı bulanıklığına getirilen bakteri süspansiyonlarından
50 μl eklenip. 35°C’de 16-20 saat inkübasyon sonrası minimum inhibitör konsantrasyonu (MİK) belirlenmiştir.Her iki yöntemle
elde edilen MİK sonuçları sıvı mikrodilüsyon MİK’leriyle karşılaştırılmıştır E. coli ATCC 25922 (kolistin duyarlı), E. coli NTCC 13846
(kolistin dirençli) ve P. aeruginosa ATCC 27853 kalite kontrol suşu olarak kullanılmıştır.
Bulgular ve Sonuç: Çalışmaya A.baumanii(n:45), P.aeruginosa(n:75), K.pneumoniae(n:71), S.maltophilia(n:7) olmak üzere toplam
198 izolat dahil edilmiştir. Bunların SMD ile 13’ü(%6.5) kolistin dirençli, 185’i(%93.5) kolistine duyarlı bulunmuştur. Tüm izolatların
Micronaut MİK-Strip testi ve SMD yöntemi ile MİK değerlerinin dağılımı Figür 1’de verilmiştir. Micronaut MİK Strip testinin kategorik
uyumu A.baumanni, P.aeruginosa ve S.maltophilia için %100 bulunmuş, disk elüsyon testi ile yalnızca A.baumannii’de böyle bir
uyum saptanmıştır. Her iki yöntemle 1 K.pneumoniae izolatının MİK’i 4 μg/ml(dirençli) bulunmuş, sınır değerle bir dilüsyon fark
büyük hata olarak değerlendirilmiştir(Tablo1).
Figür1
Tablo 1
Micronaut MİK STRİP test Disk elüsyon yöntemi
Mikroorganizma Temel
Uyum n(%)
Kategorik
Uyum n(%)
Çok büyük
hata Büyük hata Kategorik
Uyum n(%)
Çok büyük
hata Büyük hata
Acinetobacter baumannii (n:45)) 43(95,6) 45(100) - - 43(95,6) - -
Pseudomonas aeruginosa (n:75)) 67(89,3) 75(100) - - 75(100) - -
Klebsiella pneumoniae (n:71 55(77,5) 70(98,6) - 1(1,5) 68(95,8) - 1(1,5)
Stenotrophomonas maltophilia
(n:7) 7(100) 7(100) - - 6(85,7) - -
iki farklı kolistin duyarlılık testinin standart yöntem ile performans karşılaştırması
Anahtar Kelimeler: Kolistin, Sıvı disk elüsyon, Micronaut MİK-Strip
Kaynakça
Hadas Kon, Maayan Amar Ben Dalak, David Schwartz, Yehuda Carmeli, Jonathan Lellouche, Evaluation of the MICRONAUT MIC-strip colistin assay for
colistin susceptibility testing of carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii and Enterobacterales, Diagnostic Microbiology and Infectious Disease,
Volume 100, Issue 4, 2021, 115391, ISSN 0732-8893, https://doi.org/10.1016/j.diagmicrobio.2021.115391.
Two-Site Evaluation of the Colistin Broth Disk Elution Test To Determine Colistin In Vitro Activity against Gram-Negative Bacilli Patricia J. Simner, Yehudit
Bergman, Marisol Trejo, Ava A. Roberts, Remy Marayan, Tsigereda Tekle, Shelley Campeau, Abida Q. Kazmi, Drew T. Bell, Shawna Lewis, Pranita D.
Tamma, Romney Humphries, and Janet A. HindlerJ Clin Microbiol. 2019 Feb; 57(2): e01163-18.Published online 2019 Jan 30. doi: 10.1128/JCM.01163-