NEOADJUVAN KEMOTERAPİ ALAN MEME KANSERLİ HASTALARDA SİRKÜLE MİKRO RNA VE SİRKÜLE TÜMÖR HÜCRE MOLEKÜLER ANALİZLERİ İLE TEDAVİ YANITININ DEĞERLENDİRİLMESİ


Akkiprik M. (Yürütücü), Yumuk P. F., Uğurlu M. Ü., Erzik C.

TÜBİTAK Projesi, 2015 - 2018

  • Proje Türü: TÜBİTAK Projesi
  • Başlama Tarihi: Eylül 2015
  • Bitiş Tarihi: Ocak 2018

Proje Özeti

Amaç: Sirkülasyonda dolaşan tümör hücreleri (CTC) ve nükleik asitlerin moleküler analizleri gerek non invaziv bir yaklaşım olması ve gerekse tümör karakteristiğini yansıtarak hastalığın klinik seyrinin ön görülebilmesini sağlaması açısından büyük bir değer taşımaktadır. Bu çalışmanın amacı, neoadjuvan kemoterapi alan meme kanserli hastalardan tedavi öncesi ve sonrası periferal kan örnekleri alınarak, sirküle tümör hücrelerinin moleküler karakterizasyonunu yapmak, plasma mikro RNA profillerini çıkarmak ve tedaviye verilen yanıt ile ilişkisini ortaya koymaktır.

Gereç-Yöntem: Çalışmaya 36 neoadjuvan kemoterapi alan meme kanserli hasta dahil edilmiş ve hastalardan tedavi öncesi ve sonrası 10 ml kan örnekleri alınmıştır. CTC izolasyonu, tanımlanması ve moleküler analizlerinde immuno-magnetik temelli AdnaTest kitleri kullanılmış, meme kanseri (GA733-2, Muc-1 ve Her-2, Aktin), EMT (PI3Kα, Akt-2, TWIST1) ve kök hücre (ALDH1) markerları incelenmiştir. CTC pozitifliği olan seçilmiş hastalardan yeni nesil dizileme ile mikro RNA profilleri çıkarılmış, CTC pozitifliği ile paralel giden mikro RNA’lar belirlenmiş, sonrasında bunların validasyonu real-time qPCR yaklaşımı ile gerçekleştirilmiştir. Çalışma sonuçlarına uygun istatistiksel anlamlılık testleri kullanılmıştır.

Bulgular: Tedavi öncesi CTC pozitifliğini %16.7, EMT marker pozitifliğini %8.3, ALDH1 pozitifliğini ise %25 olarak bulurken, tedavi sonrası ise bu oranlar sırasıyla %18.2, %13.9 ve %9.1 olarak tespit edilmiştir. Tedavi öncesi CTC pozitifliği ile ALDH1 pozitifliği arasında anlamlı bir ilişki bulunmuştur  (p=0.0245). Tedaviye tam yanıt gösteren hastaların büyük bir çoğunluğunda CTC negatifliği dikkat çekmektedir. Plazma mikro RNA profilleme analizleri sonrasında metastaz, invazyon ve EMT-MET dönüşümünde rol alan 3 mikro RNA’nın (mir-199a-5p, 148a-5p ve 146b-5p) CTC pozitifliği ile parelel gittiği tespit edilmiştir.

Sonuç: Neoadjuvan kemoterapi alan meme kanseri hastalarında CTC pozitifliği, moleküler karekterizsyonu ve mikro RNA profilleme analizleri tedaviye verilecek olan cevabın, klinik seyrin ön görülebilmesi ve yeni tedavilerin geliştirilmesi için hedef belirlemede çok önemli bir yaklaşım olduğu görülmektedir.