Islatma Sıvılarından Enzim Üreten Haloversatil Bakterilerin İzole Edilerek Tanımlanması

Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, BAP Araştırma Projesi, 2021 - 2023

Proje Türü: Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje
Destek Programı: BAP Araştırma Projesi
Başlama Tarihi: Aralık 2021
Bitiş Tarihi: Mart 2023

Proje Özeti

Deri endüstrisinde tuzlama işlemi mikroorganizma faaliyetlerini önlemek amacıyla ham derilere uygulanmaktadır. Tuzlanmış derilerin kaybettiği suyu ve eski yumuşaklığını geri kazanması amacıyla bu deriler için ıslatma işlemi gerçekleştirilmektedir. Islatma sıvısında fazlaca bulunan organik yük, tuz ve dışkı nedeniyle ıslatma sıvısı bakterilerin gelişmesi için uygun bir ortam oluşturmaktadır. Deri üzerinde gelişen bakteriler bu derilerde önemli zarara neden olmaktadır. Bu çalışmamızda, ıslatma sıvısı numunelerinin pH ve tuz değerleri tespit edilmiştir. Islatma sıvısı numunelerindeki toplam haloversatil bakterilerin sayısı, proteolitik haloversatil bakterilerin ve lipolitik haloversatil bakterilerin toplam sayıları belirlenmiştir. Bu ıslatma sıvısı numunelerinden enzim (amilaz, kazeinaz, lipaz, ksilanaz, selülaz, proteaz, DNaz, pullulanaz, üreaz, oksidaz ve katalaz) üreten haloversatil bakteriler izole edilmiş ve 16S rRNA gen dizi analizi ile tanımlanmıştır. Farklı amino asit ve şeker kaynaklarının kullanımı gibi metabolik aktiviteleri test edilmiştir. Ayrıca enzim üreten haloversatil bakterilerin deri yapısına verdiği hasar taramalı elektron mikroskobu kullanılarak incelenmiştir. Örneklerin pH değerleri 8.80-9.30, tuzluluk oranları ise %3.5-5.5 olarak belirlenmiştir. Toplam haloversatil bakteri sayısı 3.8×104 -1.6×106 kob/ml, toplam proteolitik ve lipolitik haloversatil bakteri sayıları ise sırasıyla 1.2×104 -5.8×105 kob/ml ve 6.3×104 -4.6×105 kob/ml olarak saptanmıştır. Örneklerden beş farklı türe ait (Terribacillus halophilus, Brevibacterium luteolum, Bacillus australimaris, Bacillus siamensis ve Bacillus mojavensis) altı adet haloversatil bakteri izole edilmiştir. İzolatlar tarafından proteaz (%83), lipaz (%83), kazeinaz (%67), amilaz (%50), selülaz (%17) gibi çeşitli enzimler üretildiği belirlenirken; hiçbir izolatın ksilanaz, DNaz, pullulanaz ve üreaz enzimlerini üretmediği tespit edilmiştir. İzolatlar tarafından farklı şeker kaynakları [laktoz (%100), D-(+)-dekstroz (%100), miyo-inositol (%100), D-(+)-selobiyoz (%100), adonitol (%100), D-(-)-salisin (%100), dulsitol (%100), D-mannoz (%100), ksilitol (%83), L-(+)-arabinoz (%83), D-(-)-fruktoz (%67), D-mannitol (%67), D-(+)-trehaloz (%67), D-(-)-riboz (%50), D-(+)-melezitoz (%33) ve sükroz ( %17)] ve farklı amino asit kaynakları [L-serin(%100), L-glutamik asit (%67), DL-fenilalanin (%67), trans-4-hidroksi-L-prolin (%67), L -prolin (%67), glisin (%50), L-ornitin (%50), L-aspartik asit (%33), L-fenilalanin (%33), L-arjinin (%17), L-histidin (%17), L-lizin (%17), L-treonin (%17)] kullanılmıştır. D-sorbitol, D-(+)-galaktoz, maltoz, D-(+)-ksiloz ve L-tirozin, D-(+)-melibiyoz, L-sistin, lösin, L-izolösin, L-metiyonin, L-valin, L-alanin kaynaklarının ise hiçbir izolat tarafından kullanılmadığı tespit edilmiştir.