Akademik Veri Yönetim Sistemi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Marmara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2019
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: EMRE ÖZAYDIN
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): Serap Demir
Eş Danışman: Emrah Çakmakçı
Özet:
Lipazlar (triasilgliserol ester hidrolazlar, EC 3.1.1.3), triaçilgliserollerin hidrolizini kataliz
eden suda çözünen bir enzimdir. Candida rugosa’dan elde edilen lipazlar diger kaynaklardan
elde edilenlere göre yüksek aktiviteleri ve genis bir spesifiklik göstermeleri nedeniyle daha
fazla dikkat çekmektedir. Bu çalısmada polivinil alkol, jelatin ve hidroksimetil selüloz içeren
CMC-PVA-GEL film sentezlendi. CMC-PVA-GEL film FT-IR ile karakterize edildi.
Candida rugosa’dan elde edilen lipaz CMC-PVA-GEL film üzerine kovalent olarak
immobilize edildi. 1 g polimere 91,37 mg enzim baglandıgı bulundu. mmobilize ve serbest
enzimler p-nitrofenil palmitatın hidrolizi ve para nitrofenil linoleatın sentezi seklinde iki farklı
reaksiyon sisteminde analiz edildi. Hidrolitik aktivite ve sentetik aktivite yöntemleri
kullanılarak serbest ve immobilize enzim üzerine depolama süresi, kinetik özellikleri, sıcaklık
ve tekrar kullanılabilirlik gibi özellikleri incelenerek sonuçlar karsılastırıldı. Hidrolitik
aktivite üzerine pH etkisi incelendiginde serbest enzim pH 7’de, immobilize enzim pH 8’de
maksimum aktivite gösterdigi bulundu. mmobilizasyon sonucunda enzimin sıcaklıga olan
dayanıklılıgı gelisti ve 50°C’de maksimum aktivite gösterdi. Michaelis Menten sabiti serbest
ve immobilize enzim için sırayla 0,56 ve 1,66 mM olarak hesaplandı. Serbest ve immobilize
enzim için Vmaks degerleri sırayla 2,08 ve 0.192 mM/dakika olarak hesaplandı. 11 deneme
sonrasında immobilize enzimin aktivitesi %71 olarak tayin edildi. Serbest enzim 20 gün
içinde tamamen aktivitesini kaybetmistir. mmobilize enzim 30 günde aktivitesinin sadece
%28’ini kaybetmistir. Sentetik aktivite üzerine sıcaklık etkisi incelendiginde serbest enzim
37°C’de, immobilize enzim 60°C’de maksimum aktivite gösterdigi bulundu. Serbest ve
immobilize enzim için Km ve Vmaks degerleri sırasıyla 5 mM, 1x10-3 mM/dakika bulunurken
immobilize enzim için 0,66 mM, 1x10-4 mM/dakika olarak bulunmustur. 20 deneme
sonrasında immobilize enzim ilk aktivitesininin %30’unu kaybetmistir. mmobilize enim 30
gün sonunda aktivitesinin %64’ünü korumustur. Ticari öneme sahip olan lipazların
immobilizasyonu için yeni, maliyeti az olan polimerik desteklerin gelistirilmesi gündemde
olan bir konudur. Biz de çalısmamızda hızlı, kolay ve daha az zahmetli bir yöntemle
immobilizasyonu gerçeklestirdik.