Anne sütünde insülin benzeri büyüme faktörü I’in bağlayıcı proteinlerinin blotting metodu ile analizi

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Marmara Üniversitesi, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2001

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Mehtap Yeldan

Danışman: AYŞE OGAN

Özet:

ANNE SÜTÜNDE İNSÜLİN BENZERİ BÜYÜME FAKTÖRÜ I'İN BAĞLAYICI PROTEİNLERİNİN BLOTTİNG METODU İLE ANALİZİ Anne sütünde insülin benzeri büyüme faktörü bağlayıcı proteinlerinin belirlenmesi için öncelikle yağsız anne sütü SDS-PAGE elektroforezine tabi tutuldu ve bunu takiben Western Blotting yöntemi uygulandı. Blotting sonucu nitroselüloz membran 125I ile işaretli IGF-I ile bir gece inkübe edildi. Daha sonra Kodak BioMax MS-1 X-Ray filmi ile dört gün boyunca -70°C'de inkübasyona bırakıldı. Elde edilen filmin özel filtre kullanılarak fotoğrafı çekildi. Bu şekilde IGF-I ile bağlanan IGFBP-2 ve IGFBP-3'ün varlığı kanıtlanmış oldu. SUMMARY ANALYSIS OF INSULIN LIKE GROWTH FACTOR-I BINDING PROTEINS IN HUMAN MILK USING WESTERN BLOTTING METHOD Defatted breast milk proteins were identified by SDS-Polyacryamide gel electrophosis and the protein bands were blotted by Western Blotting method. To idedntify the insulin like growth factor-I binding proteins, the blot was incubated overnight with 125I-labeled IGF-I. The blot was then exposed to Kodak BioMax MS-1 X-Ray film for four days at -70°C to screen the proteins. The film was developed and was shown that IGFBP-2 and IGFBP-3 were bounded by labeled IGF-I.